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技術(shù)文章

小鼠循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)檢測(cè)試劑盒操作步驟
點(diǎn)擊次數(shù):862 更新時(shí)間:2017-03-21

、Hcy Elisa試劑盒包被過程(注意設(shè)置空白對(duì)照,陰性對(duì)照):

小鼠循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)檢測(cè)試劑盒將所用抗原用包被稀釋液稀釋到適當(dāng)濃度(一般所需抗原包被量為每孔20-200μg),每孔抗原加入00μl,置37℃,4h,或4℃,24h;棄去孔中液體.(為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋或?qū)迤椒旁诘撞坑袧窦啿嫉慕饘贊窈兄?

2、封閉酶標(biāo)反應(yīng)孔:

5%小牛血清置37℃封閉40min.封閉時(shí)將封閉液加滿各反應(yīng)孔,并去除各孔中的氣泡,封閉結(jié)束后用洗滌液滿孔洗滌3遍,每遍3min.

Hcy Elisa試劑盒洗滌方法:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,將洗滌液注滿板孔,放置2min略作搖動(dòng),吸干孔內(nèi)液,傾去液體后在吸水紙上拍干洗滌次數(shù)3次

3、加入待檢測(cè)樣品(建立合適的濃度梯度):

小鼠循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)檢測(cè)試劑盒檢測(cè)時(shí)一般采用:50-:400的稀釋度,應(yīng)采用較大稀釋體積進(jìn)行,一般保證樣品吸取量>20μl.

將稀釋好的樣品加入酶標(biāo)反應(yīng)孔中,每樣品至少加雙孔,每孔00μl,置于37℃,40-60min.用洗滌液滿孔洗滌3遍,每遍3min.

4、加入酶標(biāo)抗體:

酶標(biāo)抗體:根據(jù)酶結(jié)合物提供商提供的參考工作稀釋度進(jìn)行.37℃,30-60min之間.短于30min往往結(jié)果不穩(wěn)定.每孔加00μl.洗滌同前.

5、加入底物液(現(xiàn)用現(xiàn)配):

TMB-過氧化氫尿素溶液,OPD-過氧化氫底物液系統(tǒng)次之.

底物加入量:每孔00μl,置37℃避光放置3-5分鐘,加入終止液顯色.

6、終止反應(yīng):

每孔加入終止液50μl終止反應(yīng),于20min內(nèi)測(cè)定實(shí)驗(yàn)結(jié)果.

7、結(jié)果判斷:

OPD顯色后采用492nm波長(zhǎng),TMB反應(yīng)產(chǎn)物檢測(cè)需要450nm波長(zhǎng).檢測(cè)時(shí)一定要首先進(jìn)行空白孔系統(tǒng)調(diào)零.用測(cè)定標(biāo)本孔的吸收值與一組陰性標(biāo)本測(cè)定孔平均值的比值(P/N)表示,當(dāng)P/N大于2時(shí)作為抗體的效價(jià).(數(shù)值的大小依具體檢測(cè)要求而定.)

小鼠循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)檢測(cè)試劑盒經(jīng)過嚴(yán)格交叉反應(yīng)和干擾測(cè)試及穩(wěn)定性試驗(yàn);明確的敏感度;針對(duì)所有樣品類型達(dá)到的性能;廣泛的檢測(cè)范圍可以滿足大多數(shù)檢測(cè)要求;完善的售后服務(wù)和免費(fèi)的免去您的后顧之憂,凡購買試劑盒者都可享受我公司相應(yīng)折扣優(yōu)惠,如有需要,可購買Hcy Elisa試劑盒!

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