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技術(shù)文章

TPS 試劑盒標(biāo)本激活方法
點擊次數(shù):844 更新時間:2022-01-19

TPS 試劑盒標(biāo)本激活方法:


1. 將450ul 標(biāo)本稀釋液加入到一支 1.5ml 進口聚丙烯管中 , 再加 10ul 血清或血漿標(biāo)本。


2. 加20ul 1 N HC I ,蓋緊,上下混勻。 2 - 8 ℃ 放置60± 2 分鐘。


3. 加20ul 1 N NaOH, 蓋緊,上下混勻。


4. 即用,或放-20/-70 ℃ 保存3 天。計算結(jié)果時乘 以稀釋倍數(shù) 50 。 ( 注意:不同的標(biāo)本E2F1 的水平可能有較大差異,請根據(jù)實際情況靈活掌握稀釋度)


5. 細胞培養(yǎng)上清或組織勻漿 10 倍稀釋 (410ul 的標(biāo)本稀釋液+ 50ul 樣本+ 20ul 的 1N HCI+20ul 的 1N NaOH) 。


結(jié)果計算與判斷


1. 所有 OD 值都應(yīng)減除空白值后再行計算。


2. 以標(biāo)準(zhǔn)品20 00 、100 0 、500 、 250 、 125 、 62.5 、 31.2 、 0 pg /ml 為橫坐標(biāo), OD 值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。


3. 根據(jù)樣品 OD 值在該曲線圖上查出相應(yīng) E2F1 含量 ,再乘上稀釋倍數(shù)即可 。


試劑盒性能


1. 靈敏度 : 最小的E2F1 檢測濃度小于 15 pg/ml。


2. 特異性: 可同時檢測重組或天然的人 E2F1 。 不與 人其它細胞因子有交叉反應(yīng)。


3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于8.9%。

人骨肉瘤細胞;HOS

人慢性髓系白血病細胞;K562

人前列腺癌細胞;LNCaP

人乳腺癌細胞;MCF 7B

人急性淋巴母細胞性白血病細胞;MOLT-4

人小細胞肺癌細胞;NCI-H209

黑人Burkitt淋巴瘤細胞;RAJI

人B淋巴細胞瘤細胞;RAMOS

人B淋巴細胞瘤細胞;RAMOS(RA.1)

人腦瘤細胞;SF126

人腦瘤細胞;SF763

人腦瘤細胞;SF767

人皮膚黑色素瘤細胞;SK-MEL-1

人腎上腺皮質(zhì)癌細胞;SW-13

人結(jié)直腸癌細胞;T84

人急性單核細胞白血病細胞;THP-1

人神經(jīng)膠質(zhì)細胞瘤細胞;U251

人組織細胞淋巴瘤細胞;U937 [U-937]

人胃腺癌細胞;BGC-823

人低分化肺腺癌細胞;GLC-82 [GLC82]

人喉癌上皮細胞;Hep-2

人纖維肉瘤細胞;HT-1080

人絨癌細胞;JEG-3

人耐VP16絨癌細胞株;JEG-3/VP16

白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細胞;JEG-3/VP16-IL-2

TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細胞;JEG-3-VP16-TNFa

人急性T淋巴細胞白血病細胞;Jurkat, Clone E6-1

人神經(jīng)母細胞瘤細胞;BE(2)-M17


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